标准 | 捷克共和国国家标准确定将发光细菌（费氏弧菌）代替鱼作为生物毒性测试HP14的受试生物
捷克共和国对于生物毒性测试HP14国家标准
捷克共和国将生物毒性评估标准定义为HP14，有毒物质暴露限制值相关规定和评估生物毒性所依据的标准，记录于欧盟直接适用的法规和94/2016Coll法令中，用于评估有毒物质的危险特性。目前，在该标准的修订以及执行过程中，已将发光细菌（费氏弧菌）代替鱼作为生物毒性测试HP14的受试生物，以提升生物毒性评估过程的准确性和可重复性。
此次修订的科学依据来源于捷克共和国国家环境生态部门一项不同生物毒性检测方法的对比研究项目，其分析结果表明使用费氏弧菌（发光细菌）作为生物毒性评估的受试生物，可提高评估的可重复性和准确性，并可以减少评估过程中不同变量所带来的不确定性影响。
该研究项目基于2005年-2011年的CeHO 研究，主要为证明需要用陆上试验补充水生试验的理由：基于释放脊椎动物（鱼）和白芥属有机体。研究团队先后对Poecilia reticulata 或 Brachydanio rerio 鱼类、费氏弧菌、芥菜种子等生物体进行了详尽的对比分析研究。
研究结果阐述了长期以来使用鱼类进行生物毒性评估的几个问题，一方面是评估过程需要制备大量的渗滤液，而渗滤液本身会和待检测物质发生某些反应，这有可能会影响评估结果；二是不同评估机构可能会采购来自不同渠道的鱼（有些很有可能是未经认可的），因此鱼的个体质量及其是否适合进行生态毒性评估会存在较大的差异。
而使用生物发光细菌（费氏弧菌）代替鱼类进行生物毒性评估不仅符合世界范围内减少在任何实验中使用脊椎动物的趋势；而且发光细菌的生物测试分析在世界范围内很普遍，其灵敏性已被许多研究证明，包括国际标准组织（ISO）和许多国家也已将其纳入其立法（例如德国、法国、西班牙、意大利等）。除此之外该项研究还认为越高级的生命体，物种之间的多样性和差异性就越大，而鱼类相较于发光细菌而言就属于高级的生命体，所以鱼类用于生物毒性评估的结果可重复性及稳定性可能低于发光细菌作为受试生物时的结果。
Modern Water作为Microtox®生物毒性检测技术的开发者和推广者，拥有丰富的生物毒性检测分析技术和经验，使用生物发光细菌作为生物传感器已有30多年的历史。
而作为发光细菌的一种，费氏弧菌（AliiVibrio fischeri）是一种深海发光菌。其细菌细胞呼吸过程伴随自然发光，而且当接触有毒物质时发光量迅速下降，可作为人体和生态毒性的指标，并且可以通过光度计进行光度测量。所以在出现水质污染的紧急事故时，费氏弧菌可以很好的作为生物传感器快速评估水样的化学污染和生物污染程度。费氏弧菌（AliiVibrio fischeri）培养、储存、冻干、质控、检测的整套方法称为Microtox®, 包括仪器的生产工艺及制造，属于Modern Water。
上图为捷克共和国国家环境生态部门的研究人员正在使用Modern Water Microtox® LX 实验室生物毒性分析仪进行相关的分析研究，Microtox® LX 也是目前市面上唯一严格符合ISO 11348-3标准的生物毒性分析仪。
Microtox® LX 分析仪内置了多达17种急性毒性分析模式，针对不同样品的毒性强弱提供高、中、低三档稀释模式和快筛功能，最大程度地减少了测试未知样品EC50（半数效应浓度）时的检测时间和试剂消耗。同时，功能强大的Microtox® Omni 分析软件允许用户自定义各种测试参数，包括平行样数量、稀释倍数、反应时间等，以满足科研人员的实验需求。Microtox® LX 分析仪的其他重要特性包括：
● 符合ISO 11348-3, ASTM D5660, DIN等国际标准
● 高效的生物毒性预警系统，对超过2,700种简单和复杂化合物敏感
● 测试结果和其他传统毒性分析方法（如小鼠LD50、鱼类LD50）高度相关
● 全新的自动色度校正功能：根据样品的色度和浊度自动校正检测结果
● 先进的专利全动态光电倍增管（PMT），大幅提升检测灵敏度
● 快速、可靠、可再现的分析结果：样品制备后15分钟内得到结果
● 主动温控系统：实时控制样品槽和读取槽中温度，保证检测准确性和稳定性
Microtox®生物毒性检测技术简单，快速，经济，方便和可重复性，已成为当今世界上最受认可的生物毒性测定法之一。Microtox®可以在不到1个小时的时间内提供结果，可为全球的市政，工业和政府客户提供快速、准确、可靠的生物毒性检测/预警解决方案。